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小鼠ELISA检测试剂盒选择经验技术技术指南

发布时间:2017-08-22   点击次数:1469次
   小鼠ELISA检测试剂盒选择经验技术技术指南
  
  小鼠ELISA检测试剂盒经验技术也是很重要的,常见的ELISA常见技术指南:
  
  1、选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体;从同一家公司选择抗体对。
  
  2、小鼠ELISA检测试剂盒实验中为了确定*信号和zui低背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
  
  3、标准品的配制:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。
  
  4、一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
  
  5、为了优化灵敏度,建议过夜孵育标准品和标本。
  
  6、若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
  
  7、当测定混合液体中的抗原时,如血清,建议在标本稀释液中加不相干的Ig。
  
  小鼠ELISA检测试剂盒操作注意事项:
  
  1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  
  2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  
  3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  
  4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
  
  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  
  6.底物请避光保存。
  
  7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
  
  8.小鼠ELISA检测试剂盒