人ELISA检测试剂盒试验操作程序检验结果

　　人ELISA检测试剂盒试验操作程序检验结果
　　
　　人ELISA检测试剂盒样本要求
　　
　　人ELISA检测试剂盒样本类型和采集
　　
　　以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。
　　
　　1、细胞培养上清：4000rpm条件下离心20min，去除细胞颗粒和聚合物，上清液保存在-20℃以下，避免反复冻融。
　　
　　2、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，4000rpm条件下离心20min，小心地分离出血清，保存在-20℃以下，避免反复冻融。
　　
　　3、血浆：肝素，EDTA，或柠檬酸钠作为抗凝剂。在4000rpm条件下，离心20分钟取上清，血浆保存在-20℃以下，避免反复冻融。
　　
　　人ELISA检测试剂盒操作程序
　　
　　1、所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。
　　
　　2、按前面试剂准备中描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。
　　
　　3、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
　　
　　4、设置标准品孔、样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL，样本孔加待测样本50μL，空白孔不加。
　　
　　5、除空白孔外，标准品孔和样本孔，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。
　　
　　6、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
　　
　　7、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置20s，甩去洗涤液，吸水纸上拍干。
　　
　　8、如此重复4次（共洗板5次）。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。
　　
　　9、将底物A和B按1:1体积充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育15min。
　　
　　10、所有孔加入终止液50μL，在酶标仪上读取各孔吸光度（OD值）。