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ELISA 实验中给检测样本加样的步骤详解

发布时间:2018-08-06   点击次数:2366次

1. 细胞上清:前处理必须是细胞离心去除,每孔直接加 100μl 即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。

2. 脑脊液:前处理必须是细胞离心去除,每孔直接加 100μl 即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。

3. 血清血浆:加入 50 ul 样本分析缓冲液后加 50 ul 标本, 如稀释量大,请将样本与样本分析缓冲液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至 100ul。

  • ① 血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;
  • ② 血浆标本,推荐用 EDTA 的方法收集若待测样本不能及时检测,标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。
  • ③ 血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;
  • ④ 标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除。
  • ⑤ 请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。


4. 组织匀浆液的样本:要制备过程中需要在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂,防止蛋白成份被内源性蛋白酶降解,造成检测结果的值偏低。因组织匀浆液的样本蛋白种类多,含量丰富,实验参照血清血浆标本的处理方法进行,否则就会影响实验结果。具体是加入 50 ul 样本分析缓冲液后加 50 ul 标本,需稀释时,请将样本与样本分析缓冲液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至 100ul。