欢迎来到上海仁捷生物科技有限公司网站!
技术文章您现在的位置:首页 > 技术文章 > 昆虫elisa检测试剂盒对于样本的要求是怎么样的

昆虫elisa检测试剂盒对于样本的要求是怎么样的

发布时间:2018-11-24   点击次数:2043次
   昆虫elisa检测试剂盒对于样本的要求是怎么样的
  
  昆虫elisa检测试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中昆虫保幼激素(JH)的水平。向预先包被了昆虫保幼激素(JH)单克隆抗体的酶标孔中加入保幼激素(JH),温育;温育后,加入生物素标记的抗保幼激素(JH)抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅与样品中昆虫保幼激素(JH)的浓度呈正相关。
  
  昆虫elisa检测试剂盒样本要求
  
  1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
  
  2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存或根据存放,时间做相应温度调整,但应避免反复冻融,(由于样本种类过多,每个单位处理方式不一样,本说明书不做详细介绍)。
  
  昆虫elisa检测试剂盒注意事项
  
  1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  
  2.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
  
  3.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
  
  4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
  
  5.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
  
  6.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸,使用时必须注意安全。
  
  7.各步骤加样均应使用加样器,并经常校准其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  
  8.每次试验测定的同时做标准曲线,。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔浓度的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以总稀释倍数(×n)。
  
  9.配制试剂时,要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂,充分混匀对测试结果尤为重要,使用微量振荡器(使用频率),如无微量振荡器,可在反应前手工轻轻晃动酶标板1分钟,例如做圆周动作,使加入孔中的反应液混匀。
  
  10.实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作,并在使用前充分预热。
  
  11.手工洗板应注意:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。