ELISA间接法不能直接用酶标记的原因何在?

在ELISA实验中，用间接法测定抗体，不能直接将待测抗体直接用酶标记，然后直接加底物。而要加酶标抗抗体呢？

如果将酶标记到待测抗体上，相对经典的间接法更加繁琐，而且您在摸索标记条件时不能保证操作失误导致待测抗体失活；酶标二抗现在是已经商品化了的，被大规模生产，购买后使用方便。如果你的间接做的好的话，方法被优化了后，一抗二抗显色，总共的时间加起来，出结果不会超过2-3小时。

可以用直接ELISA法，就是用抗体包板，在抗原上标记酶，然后显色，这样与间接法相比就减少了一步，缩短了时间。

但是，直接法和间接法，他们各有优缺点，需要根据实验具体要求而定。
1、待测抗体一般是免疫后产生的抗体，其中有免疫失败和抗体过少等因素存在，用酶标记有许多不确定性，如用酶标记前期有测不出效价的可能，造成不必要的困惑。

2、ELISA酶联免疫中酶标抗抗体和抗体结合后有巨大的信号放大作用，可以将信号扩大千倍以上，适合于较低抗体量的测定。

3、ELISA试剂盒SCI文章筛出单抗后可以考虑直接酶标抗体，不过在确定测定体系上要费不少功夫。

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