ANG-2，血管生成素2检测方法（人ELISA）

人血管生成素2（ANG-2）ELISA试剂盒

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人血管生成素2（ANG-2）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人血管生成素2（ANG-2）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

试剂盒性能

•  检测范围：0.75 ng/mL – 24 ng/mL。
•  灵敏度：低检测浓度小于0.1 ng/mL。
•  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
•  重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。

操作步骤

注意事项

• 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
• 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
• 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
• 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
• 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
• 在储存和温育时避免强光直接照射。
• 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
• 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
• 不能使用过期产品。
• 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。