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解析羊elisa检测试剂盒的详细操作流程

发布时间:2019-09-18   点击次数:1944次
   羊elisa检测试剂盒测定在临床检验中的应用由于各种抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体,利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原,因此免疫测定的应用范围极广,在临床检验中可用于测定:
  1、体液中的各种蛋白质,包括含量极少的蛋白质如甲胎蛋白等。
  2、激素,包括小分子量的甾体激素等。
  3、抗生素和药物。
  4、病原体抗原,HBsAg、HBeAg等。
  5、另外,也可利用纯化的抗原检测标本中的抗体,例如抗-HBs等。
 
  羊elisa检测试剂盒的优势特点:
  1、*试剂:性、灵敏性、特异性。
  2、规范包被操作:吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高。
  3、先进的优化方案:回收利用率高、可靠性强。
  4、适用范围:适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
  5、可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等。
  6、节省实验经费。
 
  羊elisa检测试剂盒的操作流程如下:
  1、待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
  2、酶标板置4℃,包被过夜。
  3、洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍,之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
  4、阴性对照孔每孔加入PBS50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
  5、酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
  6、洗板,同(4)。
  7、每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液100μl。
  8、酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
  9、洗板,同(4)。
  10、每孔加TMB显色液100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
  11、每孔加100μl2mol/LH2SO4终止反应。
  12、分别测450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
  13、数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。