植物elisa试剂盒检测将纯化的人白细胞介素抗体涂于微孔板上，制成固相抗体。将白细胞介素依次加入包被单克隆抗体的微孔中，与HRP标记的白细胞介素抗体结合形成抗体-抗原-酶标记的抗体复合物。在*清洗后，将基板TMB添加到颜色中。在使用之前，应在室温下将工具箱从冷藏环境中取出15-30分钟。如果打开后酶标板没有用完，应将酶标板存放在密封袋中。在使用之前，应在室温下将工具箱从冷藏环境中取出15-30分钟。如果打开后酶标板没有用完，应将酶标板存放在密封袋中。
1、待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
2、酶标板置4℃，包被过夜。
3、洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4、阴性对照孔每孔加入PBS50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
5、酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
6、洗板，同（4）。
7、每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液100μl。
8、酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
9、洗板，同（4）。
10、每孔加TMB显色液100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
11、每孔加100μl2mol/LH2SO4终止反应。
12、分别测450nm吸光值W1和630nm吸光值W2，zui终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13、数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
植物elisa试剂盒检测的操作注意事项：
1、试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品
6、洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7、底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8、加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9、按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
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