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介绍鱼elisa检测试剂盒样品收集、处理及保存方法

发布时间:2020-04-16   点击次数:1539次
  鱼elisa检测试剂盒的实验原理:
  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记 的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终 的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
 
  样品收集、处理及保存方法:
  1、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
  2、血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
  3、细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
  4、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
  5、保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
 
  鱼elisa检测试剂盒的注意事项:
  1、操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。
  2、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  3、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  4、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  5、底物请避光保存。
  6、试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm。
  7、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须注意安全。