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详细分析猪ELISA检测试剂盒的技术流程

发布时间:2020-06-18   点击次数:255次
  猪ELISA检测试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪组织因子(TF)。用纯化的猪组织因子(TF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加猪组织因子(TF),再与 HRP 标记的猪组织因子(TF)抗体结合,形成抗体抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的猪组织因子(TF)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中猪组织因子(TF)浓度。
 
  优势:
  1、采用全进口原料和抗体:高效、灵敏、特异,严格引进国际技术标准进行批量生产。
  2、先进的优化方案:稳定的重复性和可靠性。
  3、提供免费代测服务(为客户提供来样检测服务,*限度实验结果的有效性)
  4、产品质量保证,提供全程技术指导。
  5、友情提醒:试剂盒使用完毕后,请妥善处理相关耗材,避免环境污染!
 
  猪ELISA检测试剂盒技术流程:(双抗体夹心法)
  1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
  2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
  3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
  4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
  5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
  6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
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