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昆虫elisa检测试剂盒的样本一定要满足这些要求

发布时间:2020-09-22   点击次数:1349次
  昆虫elisa检测试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中昆虫保幼激素(JH)的水平。向预先包被了昆虫保幼激素(JH)单克隆抗体的酶标孔中加入保幼激素(JH),温育;温育后,加入生物素标记的抗保幼激素(JH)抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅与样品中昆虫保幼激素(JH)的浓度呈正相关。
 

  昆虫elisa检测试剂盒的样本要求:
  1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
  2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存或根据存放,时间做相应温度调整,但应避免反复冻融,(由于样本种类过多,每个单位处理方式不一样,本说明书不做详细介绍)。
 
  昆虫elisa检测试剂盒的操作流程:
  1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。
  3、样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
  4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次。
  6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7、每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。