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大鼠血管生成素1ELISA检测试剂盒操作步骤

发布时间:2021-06-24   点击次数:188次

大鼠血管生成素1ELISA检测试剂盒操作步骤

 

样本处理及要求:
1.  血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4.  细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

 

大鼠血管生成素1ELISA检测试剂盒操作步骤

有以下操作技巧:
A、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
B、合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
C、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
D、要尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。
E、样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。


储存条件和试剂盒准备:
1)有效期内的试剂如开封后未用完,请2-8°C 保存。
2)过期的试剂请不要用,打开后的试剂2-8°C 保存。
3)酶标包被板必须2-8°C 保存,如有未用完的酶标包被板,打开的铝箔袋须密封并2-8°C 保存。
4)试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

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