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按这个步骤操作牛ELISA检测试剂盒,简单易懂

发布时间:2021-12-23   点击次数:1031次
  牛ELISA检测试剂盒主要用于测定血清、血浆、组织和相关液体样本中的含量或者活性,刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响,您可放心使用。
 
  实验原理:
  牛ELISA检测试剂盒采用夹心酶免法,采用了两种高特异性抗体,TMB作为着色剂,最终溶液所显示的颜色强度与样品中指标的量成正比。
 
  特别注意:
  1、样品采集后应立即检测,如需贮存的,则应放置在冰冻条件下,避免反复冻融,检测前应在低温下将其溶解并*混合;
  2、如有需要,样品可用EIA缓冲液稀释;
  3、建议试验样品和标准品做双份检测;
  4、试验样品应在中性PH范围内,有机溶剂的污染会影响试验;
  5、只能使用试剂盒内提供的洗涤液洗板,洗板不充足可能会导致试验失败;
  6、*倒去洗涤液,吸水纸上拍干,不能用吸水纸擦拭微孔;
  7、底物液应避光保存,因其对光敏感,且要避免接触金属;
  8、加入终止液后30min内读数。
 
  牛ELISA检测试剂盒操作步骤:
  1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃;
  2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
  3、样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加;
  4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min;
  5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次;
  6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min;
  7、每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。