欢迎来到上海仁捷生物科技有限公司网站!
技术文章您现在的位置:首页 > 技术文章 > 在使用猪ELISA检测试剂盒前要提前做好哪些工作?

在使用猪ELISA检测试剂盒前要提前做好哪些工作?

发布时间:2022-06-27   点击次数:225次
  猪ELISA检测试剂盒的关键技术参数包括板内差异、板间差异、批间差异、重复性、特异性、散布反应、回收率等。如果经常进行ELISA检测,建议使用同一个试剂盒。制造商,以尽可能保证数据的可重复性(当然,条件是测试条件的一致性)。至于用于科研的ELISA试剂盒,不同厂家使用的抗体对、酶和底物、生产技术和开发实力不同,不同厂家的试剂盒测得的数据也会不同。
 
  实验前的准备工作:
  1、准备好所有实验额外所需物品,如试管 吸头 移液器 离心机等。
  2、确定试剂盒在有效期内。
  3、仔细阅读说明书。
  4、按说明书确定所有试剂齐全(数量 体积)。
  5、标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。
  6、根据检测标本数量确定所需试剂的量。
  7、按说明书将所用试剂盒平衡至室温,配制所需试剂。
 
  猪ELISA试剂盒的样本处理及要求:
  1、血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
  2、血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
  3、组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
  4、细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
在线客服
电话咨询 021-60346444
在线客服