鱼elisa检测试剂盒运用双抗夹心ELISA法定量测定血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中(Ig)含量。下面我们来看看它具体实验前需要准备好哪些工作以及操作步骤？
实验前的准备工作：
1、准备好所有实验额外所需物品，如试管 吸头 移液器 离心机等。
2、确定试剂盒在有效期内。
3、仔细阅读说明书。
4、按说明书确定所有试剂齐全（数量 体积）。
5、标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。
6、根据检测标本数量确定所需试剂的量。
7、按说明书将所用试剂盒平衡至室温，配制所需试剂。
鱼elisa检测试剂盒的操作步骤：
1、使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7、每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8、取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9、在450nm波长处测定各孔的OD值。
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