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植物elisa试剂盒在技术上有哪几个关键点?

发布时间:2022-12-23   点击次数:662次
  植物ELISA试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在植物学检验的各领域中。
 
  植物ELISA试剂盒实验原理:
  试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被植物白介素1α(IL-1α)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物白介素1α(IL-1α)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
 
  优势:  
  1、进口抗体:高效、灵敏、特异; 
  2、规范包被操作:吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高;
  3、先进的优化方案:回收利用率高 可靠性强;
  4、适用于体液 组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本;
  5、可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等X。
 
  植物ELISA试剂盒技术关键:
  1、细胞上清:前处理有必要把细胞离心去掉,每孔直接加100μl即可。假定浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释;
  2、脑脊液:前处理有必要把细胞离心去掉,每孔直接加100μl即可。假定浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释;
  3、血清血浆:请参与50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大,请将样本与样本分析缓冲液等量参与,缺少部分用标准品稀释液赔偿至100ul;
  4、组织匀浆液的样本,要制备过程中需要在缓冲液中参与蛋白酶抑制剂,防止蛋白成份被内源性蛋白酶降解,构成查看效果的值偏低。