介绍一下人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA检测试剂盒的操作方法
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人载脂蛋白 A1(apo-A1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP 酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物 TMB 显色,TMB 在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人载脂蛋白 A1(apo-A1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
灵敏度:15.1ng/mL
载脂蛋白A1是一种蛋白质,由APOA1基因编码。作为高密度脂蛋白颗粒的主要成分,它在脂质代谢中具有特殊作用。APOA1基因位于第11条染色体上,具体位置为11q23-q24,该基因包含4个外显子。APOA1编码一个28.1kDa的蛋白质,由243个氨基酸组成;通过质谱数据观察到21个肽。载脂蛋白A1是血浆中高密度脂蛋白颗粒的主要蛋白成分。从肠道细胞分泌的乳糜微粒也含有载脂蛋白A1,但它在血液中迅速转移到高密度脂蛋白。该蛋白作为高密度脂蛋白颗粒的一个组成部分,通过接受细胞内的脂肪(包括动脉壁内的巨噬细胞,这些巨噬细胞已被氧化的低密度脂蛋白颗粒摄入的脂肪超载),使脂肪分子外流到其他地方,包括回到低密度脂蛋白颗粒或到肝脏排泄出来。
介绍一下人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA检测试剂盒的操作方法
结果判断:
1. 计算标准品和样本复孔的平均 OD 值并减去空白孔的 OD 值作为校正值。以浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在双对数坐标纸上绘出四参数逻辑函数的标准曲线(作图时去掉空白组的值)。
2. 若样品 OD 值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测并在计算样本浓度时乘以相应的稀释倍数。
典型数据和参考曲线:以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能: