解析鸡elisa检测试剂盒标准曲线做不好的原因

发布时间：2021-12-28 点击次数：1347次

　　鸡elisa检测试剂盒标准曲线做欠好的原因分析，刚刚触摸Elisa实验，研讨鸡透明质酸（HA）相关目标的实验，做完鸡透明质酸（HA）实验后反应标准曲线的梯度都欠好。刚加完显色剂的时分梯度还算明显，但是显色比较浅，跟着时刻延伸（大约6、7分钟）往后梯度就不明显了。停止反应后测得的值梯度就没有了。

　　为此，我公司技术员对鸡elisa检测试剂盒标准曲线做不好的原因做出分析：

　　1、刚加完显色剂时梯度明显：显色液可能是从高浓度向低浓度孔加的；

　　2、酶浓度太高，导致最终显色结果都是高的；

　　3、包被-酶标系统不匹配或许酶标的非特异反应太强，或许酶标仪读数规划不够；

　　4、样本中有可以催化底物的物质，没洗下来；

　　5、建议：包被、酶标重新做梯度，先用较低的浓度把梯度探究好，然后再优化灵敏度，最终调出所需的灵敏度、线性规划；

　　6、有条件的话，可以把酶免的蛋白系统移植到板式化学发光上，加完底物三分钟读数；

　　7、蛋白系统灵敏度够的话，显色十分钟就差不多了；

　　8、酶是自己标的这种情况的，HRP比例不要太高。

　　完好的鸡elisa检测试剂盒首要包含：

　　1、酶的底物；

　　2、已包被抗原或抗体的固相载体；

　　3、酶符号的抗原或抗体；

　　4、结合物及标本的稀释液；

　　5、洗涤液；

　　6、阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参阅规范品和控制血清；

　　7、酶反应停止液，常用的HRP反应停止液为硫酸，其浓度按加量及比色液的终究体积而异，在板式ELISA中一般选用2mol/L。