鸡elisa检测试剂盒作为家禽疫病监测的核心工具，其原理基于抗原-抗体特异性结合与酶促反应的双重放大效应。该技术通过将抗原或抗体固定于固相载体（如聚苯乙烯微孔板），结合酶标记的检测抗体，实现样本中目标物质的高灵敏度定量或定性分析。
一、核心原理：双抗体夹心法的典型应用
以鸡免疫球蛋白G（IgG）检测为例，试剂盒采用双抗体夹心法：酶标板预包被抗鸡IgG抗体，样本中的IgG与固相抗体结合后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的酶标二抗，形成“固相抗体-IgG-酶标二抗”复合物。加入显色底物四甲基联苯胺（TMB）后，HRP催化底物生成蓝色产物，终止反应后溶液转为黄色，其吸光度值（OD值）与样本中IgG浓度成正比。通过标准曲线线性拟合，可精确计算样本浓度，检测范围可达0-2000ng/mL。
二、关键步骤与操作要点
1.固相载体包被：将特异性抗体（如抗鸡IgG）以0.5-5μg/mL浓度包被于96孔板，4℃过夜或37℃孵育2-4小时，确保抗体均匀吸附。
2.样本孵育：加入稀释后的鸡血清/血浆样本，37℃孵育1小时，使目标抗原（如IgG）与固相抗体充分结合。
3.酶标抗体结合：加入HRP标记的检测抗体，37℃孵育30分钟，形成夹心复合物。
4.洗涤与显色：通过PBST（含0.05%吐温-20的PBS）洗涤5次，去除未结合成分；加入TMB显色液避光反应10-15分钟，终止后于450nm波长测定OD值。
三、应用场景与优势
该技术广泛应用于鸡新城疫病毒、AIV等抗体检测，以及药物残留（如磺胺类）筛查。以AIV抗体检测试剂盒为例，其采用间接ELISA法，可检测H5、H7等亚型抗体，敏感性达95%以上，批内变异系数＜3%，适用于规模化养殖场的疫病监测。相比传统试纸条，鸡elisa检测试剂盒具有操作标准化、结果可量化、成本低廉等优势，单次检测成本可降低至5元/样本以下。
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