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分享猪白细胞介素2ELISA试剂盒操作方法

发布时间:2017-11-30   点击次数:1222次

猪白细胞介素2ELISA试剂盒操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

Elisa试剂盒标准曲线图

(此图仅供参考)

猪白细胞介素2(IL-2)ELISA试剂盒性能

1. 检测范围:10 pg/mL – 320 pg/mL。

2. 灵敏度:zui低检测浓度小于1.0 pg/mL。

3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。